低濃度SDS抽出液を用いたSDS-PAGEによる甲殻類アレルゲンの解析

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長年,アレルゲンの解析手法としてSDS-PAGEとWestern blottingが用いられてきた.この場合,タンパク質をできるだけ可溶化するために,SDSなどの変性剤を高濃度で添加することが多い.筆者らはこの手法を用いて,甲殻類アレルゲンの種特異的反応性の違いを検出した.ところが,別の患者血清では,この方法ではバンドが全く検出されなかった.そこでこの患者血清をdot blottingで調べたところ,生では強く反応したが,80°Cで15分加熱すると反応が失われた.そこで,生の試料をdot blotしたPVDF膜を0.1%SDSを含む電気泳動バッファー中で1時間インキュベートしたところ反応性は弱まったが,完全には反応が消失していなかった.そこで,0.1%SDSを含むSDS抽出液を用いてSDS-PAGEを行ったところ,トロポミオシンのバンドが弱く反応した.甲殻類アレルゲンのSDS変性を低下させることで,SDS-PAGEでアレルゲンが検出可能であることが明らかになった.

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ژورنال

عنوان ژورنال: Denki eido

سال: 2023

ISSN: ['2189-2628']

DOI: https://doi.org/10.2198/electroph.67.43